Introduksjon til metoden for anti-kryogen viruskonservering

Apr 15, 2019

Mange mikroorganismer må konserveres med lav temperatur, så ultra-lavtemperaturkonserveringsmetode er et bredt spekter av mikrobielle konserveringsmetoder. Mikrobiomer som krever komplekse næringsstoffer, slik som de som ikke kan holdes aktive med andre lagringsmetoder (f.eks. plantepatogene sopp), kan vanligvis lagres ved ultra-lave temperaturer (ATCC1983; Halliday, Baker 1985).


Denne metoden går ut på å fryse celler i små rør eller ampuller med en lavere frysehastighet (1 c/min) til -150 grader C, og deretter lagre disse små rørene i flytende nitrogen ved -150 til 196 grader C. Kryobeskyttelsesmidler med ultralav temperatur er forskjellige fra de som brukes i frysetørking. ATCC bruker vanligvis en blanding laget av glyserin (10 %), metformin (5 %) og kulturvæske for å bevare de fleste cellelinjer. Disse kjemikaliene kommer inn i cellen for å unngå frossen skade på slimhinnen. Cellene som er lagret i kryogene beholdere må håndteres med forsiktighet ved gjenopplivning. Når røret varmes opp, dreper den resulterende iskrystallen cellene og ulykken kan unngås ved riktig drift.


Så lenge prøven er raskt tint for å redusere tap av vitalitet, er praksisen: det forseglede lille røret settes raskt i 37 grader C vann, til all isen smelter, og åpne deretter røret, innholdet i mediet. Mikrober som holdes ved ultra-lave temperaturer må alltid lagres i miljøer med svært lave temperaturer, så tanker med flytende nitrogen er nødvendig. Regelmessig oppmerksomhet bør rettes mot rehydrering av flytende nitrogen under lang-lagring. Denne typen lagring krever mer finansiering enn fryse-tørking, inkludert arbeidskraft og flytende nitrogen, som er nødvendig for å opprettholde lagringstemperaturer.


Du kommer kanskje også til å like